Акустические волны в аксональной мембране и кавеолины - новые мишени для лечения боли высокочастотным ультразвуком. Илья Кругликов (д.ф-м.н., президент Wellcomet)

Введение

В течение долгого времени существовал широкий консенсус о том, что происхождение периферической боли в основном связано с генерацией потенциалов действия (ПД) и их распространением по аксональной мембране. Считалось, что ПД имеют чисто электрическое происхождение, хорошо описываемое классической моделью Ходжкина-Хаксли. Согласно этой модели, деполяризация аксональной мембраны за пределами порогового потенциала приводит к ее локальному возбуждению и генерации спайков, демонстрирующих некоторые типичные особенности, такие как поведение «все или ничего», пороговая стимуляция и солитарный характер. Поскольку генерация ПД в основном связана с функционированием ионных каналов в аксональной мембране, основное внимание в анестезии уделялось методам лечения, влияющим на работу белков в этих структурах. Эта модель долгое время оставалась доминирующей, даже несмотря на очевидное противоречие с другим краеугольным камнем анестезиологии – корреляцией Мейера-Овертона, утверждающей, что эффективность применяемых анестетиков положительно связана с их липофильностью. Такая корреляция наблюдалась в очень широком интервале растворимостей и показала, что основным местом анестезирующего действия должны быть не ионные каналы, а липидные компоненты нейронной мембраны.

Однако некоторое время назад было обнаружено, что аксоны во время своего возбуждения генерируют не только электрические, но и механические волны, которые могут распространяться по аксональной мембране с чрезвычайно низким затуханием. Электрические и механические волны взаимодействуют друг с другом, вызывая реципрокное электромеханическое возбуждение в аксональной мембране. Это открытие привело к сдвигу парадигмы в нейростимуляции и лечении боли – от прямого подавления электрических сигналов в аксонах посредством применения внешней электростимуляции к более комплексным методам лечения, связанным с «разъединением» электромеханических сигналов в аксональной мембране. Одним из таких методов является применение ультразвуковых волн (УЗ), которым в недавнем прошлом было уделено много внимания из-за интенсивных исследований в области ультразвуковой нейромодуляции.¹

Хотя применение УЗ считалось стандартным методом лечения периферической боли, хорошо известно, что такое лечение показывает неоднозначные результаты даже при одинаковых болевых состояниях. Здесь мы анализируем возможные причины таких различий с учетом новых аксональных мишеней для УЗ, выявленных в последние годы.

Генерация и распространение акустических волн в аксональной мембране

Ранние исследования показали, что передача ПД модулирует вязкость аксональной мембраны и создает дополнительное давление до 10 мПа в аксоплазме.^2,3 Гораздо позже выяснилось, что развитие ПД сопровождается модуляцией диаметра аксона и что, временная зависимость этого процесса очень похожа на ПД.^4,5 Эти наблюдения показали, что возбуждение аксональной мембраны не имеет чисто электрического происхождения и должно включать некоторые механические и конформационные изменения. Такое предположение привело к разработке различных электромеханических моделей, описывающих механические поверхностные волны, индуцируемые в аксональной мембране во время распространения ПД, а также индукцию ПД путем приложения механических сил к этой мембране.^4,6-8 Эти поверхностные волны имеют гораздо меньшее затухание, чем обычные объемные волны, что позволяет им распространяться далеко от места их возникновения.

Также было продемонстрировано, что нелинейные поверхностные акустические волны могут распространяться в искусственных липидных мембранах, если термодинамическое состояние этих мембран близко к соответствующей точке фазового перехода (из гелевой в жидкую фазу).⁹ В физиологических условиях состояние аксональной мембраны действительно находится довольно близко к этой точке, и поэтому поверхностные акустические волны могут легко стимулироваться механическими, тепловыми и химическими факторами, что делает возникновение и распространение поверхностных акустических волн в этих структурах фундаментальным явлением. Среди прочего, сообщалось, что такие волны могут быть вызваны электрической стимуляцией⁷ и локальным пороговым окислением границы раздела.¹⁰

Это означает, что механические поверхностные волны могут индуцироваться как в нативных, так и в искусственных мембранах и имеют универсальный механизм генерации. Открытие этих волн оказало значительное влияние на теорию и практические применения в области центральной и периферической нейростимуляции. В то же время, это также позволило по-другому взглянуть на взаимодействие аксонов и УЗ при лечении боли.

Радиационная сила как основной фактор прямой ультразвуковой модуляции ПД

Ранние исследования, касающиеся применения сфокусированного УЗ различной частоты к периферическим нервам, показали, что увеличение частоты вызывает усиленную модуляцию генерации ПД в аксональной мембране. Это явление в основном связывали с тепловым действием УЗ и объясняли более сильным поглощением высокочастотных волн тканями. Недавно разными авторами было показано, что УЗ способен модулировать генерацию ПД в нейронах как in vitro, так и in vivo в широком диапазоне гораздо более низких интенсивностей (0,1-10,0 Вт/см²).¹¹ Эта модуляция происходила без какого-либо значительного повышения температуры, что четко указывает на первостепенную роль механических воздействий в этом явлении. Механические действия УЗ могут быть связаны либо с развитием кавитации в ткани, либо с созданием радиационного давления на мембраны. Исследование активности появления спайков ганглиозных клеток при применении УЗ частотой 0,5-43,0 МГц показало, что сила аксональной модуляции возрастает с увеличением частоты УЗ.¹² Также актуальные для этого обсуждения эксперименты с фиксацией напряжения в липидных бислоях продемонстрировали, что УЗ частотой 1 МГц и 43 МГц индуцирует одинаковые токи включения/выключения.¹¹ Так как вероятность кавитации быстро уменьшается с увеличением частоты УЗ, основным фактором, ответственным за такую модуляцию, должны быть радиационные силы, индуцированные УЗ в аксональной мембране.

Акустическая радиационная сила на поверхности клетки зависит от разных физических параметров и существенно варьируется для мишеней разной геометрии, например, сферических клеток и цилиндрических аксонов. Эта сила также зависит от соотношения между волновым числом ультразвуковой волны (k) и радиусом аксона (R), где k = 2πf/c, где f и c – частота и скорость УЗ соответственно. Принимая типичный радиус аксона за 1 мкм и скорость УЗ в мягких тканях за 1500 м/с, условие kR << 1 будет выполняться для f << 240 МГц и, следовательно, для всех типичных частот УЗ, применяемых для нейронной стимуляции. В случае ультразвуковой волны, направленной вдоль оси цилиндрического аксона, радиационная сила, индуцированная в аксональной мембране, в этом приближении будет линейно пропорциональна частоте УЗ.¹³

Флуоресцентные исследования липидных мембран, подвергнутых ультразвуковому излучению, выявили существенные конформационные изменения в этих структурах, которые были особенно заметны, когда мембрана термодинамически находилась вблизи точки фазового перехода.¹⁴ Хорошо известно, что вблизи этой точки теплоемкость и сжимаемость липидной фазы достигают максимальных значений. Поскольку радиационная сила, индуцированная УЗ, пропорциональна адиабатической сжимаемости мишени¹³, механическое давление, индуцированное УЗ в аксональной мембране, также достигнет своего максимума, если система находится вблизи своего фазового перехода.

В целом, ультразвуковые волны могут вызывать механическое возмущение в аксональной мембране, генерируя распространяющуюся механическую поверхностную волну, которая, в свою очередь, может вызывать образование ПД. Этот механизм в настоящее время считается важным в нейростимуляции¹ . С С другой стороны, механическое напряжение, вызванное в аксональной мембране акустической радиационной силой, может сильно сдвинуть ее термодинамическое состояние от точки фазового перехода, что также будет подавлять генерацию ПД. Это особенно важно, если ультразвуковая волна может создавать достаточное термомеханическое напряжение вблизи аксональной мембраны. Как мы обсуждали ранее, такое напряжение быстро возрастает с увеличением частоты УЗ.¹⁵

В то время как прямая модуляция ПД является важным прямым механизмом взаимодействия между УЗ и аксонами, другая мишень, связанная с экспрессией кавеолинов в клеточных мембранах, также должна иметь большое значение, по-крайней мере, при некоторых типах боли.

Кавеолин-1 как мишень для косвенной модуляции боли

Кавеолин-1 (Cav-1) является основным структурным компонентом инвагинаций кавеолярных плазматических мембран, обогащенным холестерином и сфинголипидами, которые присутствуют в разных типах клеток. Cav-1 участвует в быстрой адаптации к изменениям клеточного объема, в множественных процессах передачи сигналов, а также в процессах эндо- и экзоцитоза. Cav-1 демонстрирует реципрокное взаимодействие с окислительным стрессом: в то время как индукция Cav-1 ослабляет окислительный стресс, вызванный H₂O₂,¹⁶ применение окислительного стресса модулирует экспрессию Cav-1 дозозависимым и специфичным для клеточного типа образом.^17-19 Этот эффект напрямую связан с болевым ощущением: как это было продемонстрировано на моделях мышей, антиоксиданты ослабляют сжатие седалищного нерва, что указывает на непосредственное вовлечение окислительного стресса в развитие нейропатической боли.²⁰

Долгое время считалось, что кавеолины не принимают непосредственного участия в передаче нейронных сигналов. Основная причина этого заключалась в том, что эти белки были обнаружены только в глиальных клетках и синапсах, но не в аксональных мембранах.²¹ Однако быстрое распространение потенциалов действия по аксональным волокнам моторных и сенсорных нейронов возможно только при их миелинизацию, которую обеспечивают шванновские клетки, обволакивающие аксоны. Важно отметить, что Cav-1 в большом количестве присутствует в неаксональных миелиновых мембранах шванновских клеток, и недостаток Cav-1 нарушает функционирование этих клеток, а также снижает регенерацию нервов после повреждения. С другой стороны, экспрессия Cav-1 значительно возрастает во время миелинизации и сильно снижается после аксотомии.²²

Шванновские клетки реагируют на окислительный стресс, вызванный H₂O₂, апоптозной гибелью клеток. Этот эффект может быть сильно ослаблен внеклеточной индукцией белка теплового шока 72 (Hsp72).²³ Такое опосредованное Hsp72 уменьшение повреждений, вызванных окислительным стрессом в шванновских клетках, оказывает нейропротекторное действие на периферические нервы, повышая их устойчивость к стрессу.²⁴ Примечательно, что этот белок демонстрирует положительную и почти линейную корреляцию с уровнем Cav-1 в коже человека и мыши, указывая на то, что индукция Hsp72 должна приводить к усиленной экспрессии Cav-1.²⁵

Кроме того, ноцицептивная боль связана с локальным воспалением в пораженной ткани, и широко распространено мнение, что этот путь включает простагландин E₂ (PGE₂). PGE₂ представляет собой продукт циклооксигеназы (ЦОГ) и липидный медиатор, а ингибиторы ЦОГ-1/ЦОГ-2, как сообщалось, эффективно подавляют воспалительную боль за счет снижения экспрессии PGE₂.²⁶ Примечательно, что ЦОГ-2 локализуется и физически взаимодействует с Cav-1.²⁷ Поскольку опосредованное Cav-1 угнетение ЦОГ-2 снижает экспрессию PGE₂,²⁸ Cav-1 можно рассматривать как потенциальную мишень при лечении ноцицептивной боли, вызванной воспалением.

Более того, известно, что в болевом ощущении участвуют разные ионные каналы транзиторного рецепторного потенциала (TRP), в том числе TRP-анкирин 1 (TRPA1). Этот TRP экспрессируется в ноцицептивных сенсорных нейронах и эпителиальных клетках, где он играет ключевую роль в обнаружении химических, тепловых и механических токсичных стимулов.^29-31 TRPA1 является обычным путем для про-ноцицептивных агонистов, генерируемых при различных болевых состояниях, и поэтому периферическое применение антагонистов TRPA1 должно быть эффективным методом для ослабления первичной гипералгезии.³² У мышей канал TRPA1 регулируется локальной липидной средой, и недавно было высказано предположение, что выбор взаимодействий между липидами и TRPA1 в качестве мишени может быть стратегией лечения боли и нейрогенного воспаления.³¹ Действительно, амплитуда ответов на такие стимулы, как холод и липополисахарид (токсичный побочный продукт бактериального лизиса), была значительно ниже в клетках, обработанных метил-β-циклодекстрином, ухудшающим взаимодействие между липидами и TRPA1 и снижающим содержание Cav-1 в плазматической мембране дозозависимым образом.³¹ TRPA1 экспрессируется не только в ноцицепторах, но и в шванновских клетках. В то время как подавление TRPA1 в ноцицепторах ослабляло механическую аллодинию, но не влияло на инфильтрацию макрофагов и окислительный стресс, что приводило к развитию болевых ощущений в травмированной области, подавление этих каналов в шванновских клетках уменьшало как аллодинию, так и нейровоспаление.³³ Следовательно, с большой долей уверенности можно предположить, что модификация экспрессии Cav-1 в шванновских клетках может модулировать болевые ощущения.

Кроме того, механическое повреждение мягких тканей, вызывающее появление отека в травмированной области, часто сопровождается болью и воспалением. Патофизиологически отек связан с чрезмерным накоплением жидкости в тканях, вызванным утечкой из капилляров. Может происходить внутриклеточная или внеклеточная задержка жидкости, что приводит к локальному сужению нервов, вызывая болевые ощущения, с последующей дегенерацией миелинизированных аксонов. Cav-1 сильно экспрессируется в эндотелиальных клетках и регулирует обмен жидкости между системой кровообращения и периферическими тканями. Действительно, мыши с Cav-1^-/- демонстрируют выраженные аномалии вазоконстрикции и вазорелаксации³⁴, а также повышенную проницаемость микрососудов, что указывает на то, что утечка из микрососудов опосредована Cav-1.³⁵ Этот эффект наблюдался не только в поврежденных мягких тканях, но и при отеке легких и головного мозга.^36,37 Было показано, что перепроизводство Cav-1 ослабляет отек, предотвращая деградацию межклеточных контактов;³⁷ следовательно, Cav-1 может служить эффективной мишенью на ранних стадиях развития отека.

Cav-1 также участвует в развитии диабетической периферической нейропатии. Диабетические мыши с Cav-1 KO демонстрируют гораздо более выраженное снижение скорости проводимости двигательного нерва, а также механической и тепловой чувствительности, чем их недиабетические собратья.³⁸ Хорошо известно, что миелинизированные шванновские клетки при диабетической невропатии подвергаются дегенерации. Подавление Cav-1 усиливало индуцированную нейрегулином демиелинизацию нейронов, и этот эффект не был связан с потерей нейронов, поскольку аксоны оставались нетронутыми.³⁹ Поскольку индуцированная экспрессия эндогенного Cav-1 обеспечивает восстановление миелинизации, для уменьшения невропатической боли может использоваться модуляция Cav-1.

Остеоартрит обычно связан с развитием воспаления и хронической боли. Гамма-рецептор, активируемый пероксисомным пролифератором (PPARγ), демонстрирует защитный эффект при остеоартрите in vivo⁴⁰; с другой стороны, PPARγ и его агонисты являются известными положительными регуляторами Cav-1 в различных типах клеток^41,42. Такое взаимодействие соответствует в целом положительному эффекту индукции Cav-1 при воспалительных состояниях⁴³ и указывает на то, что модуляция Cav-1 может быть мишенью при остеоартритной боли.

И последнее, но не менее важное: травмы мышц являются хорошо известным источником острой и хронической боли. Процесс регенерации мышц в значительной степени связан с модуляцией экспрессии Cav-1 в недифференцированных миогенных клетках-предшественниках (сателлитах).⁴⁴ Эти клетки быстро пролиферируют и соединяются с поврежденными волокнами после травм мышц. В нормальных условиях клетки-сателлиты находятся в состоянии покоя: они индуцируют повышенную экспрессию Cav-1, вызывая клеточное старение и остановку цикла, тогда как подавление Cav-1 вызывает индукцию цикла. Чтобы инициировать регенерацию мышц, клетки-сателлиты должны мигрировать в поврежденную область вскоре после травмы. Одновременно с этой миграцией уровень Cav-1 должен временно подавляться. Восстановление экспрессии Cav-1 обычно происходит через три дня после травмы, что является характерным временем для дифференцировки предшественников в мышечные волокна. Однако в случае высокого базального уровня экспрессии Cav-1 (например, у трансгенных мышей с повышенной экспреесий Cav-1) миогенные предшественники не способны снижать Cav-1 до достаточно низкого уровня, допускающего их миграцию, что может привести к нарушению регенерации мышц.⁴⁴ То есть Cav-1 также может быть интересной мишенью для регенерации мышц, а подавление эндогенного Cav-1 на ранних стадиях острого мышечного повреждения или в случае замедленного восстановления мышц должно обеспечивать их улучшенное заживление.

УЗ как локальный модулятор уровня Cav-1 в ткани

Кавеолы механически связаны с актиновым цитоскелетом, и реорганизация этой внутриклеточной сети может сильно изменить их поверхностную плотность.⁴⁵ В зависимости от амплитуды механической деформации может происходить как усиление жесткости, так и размягчение (флюидизация) цитоскелета.^46,47 В то время как механические силы на частоте 1 Гц флюидизируют цитоскелет и изменяют микродоменную структуру плазматической мембраны при деформации около 10%, приложение механических сил с частотой 1 МГц снижает критическую деформацию примерно до 10^-5.⁴⁸ Применение более высокой интенсивности и частоты УЗ приводит к более высокому уровню механического стресса в клетках и, таким образом, может сильнее модифицировать кавеолы⁴⁹, что говорит о том, что УЗ более высоких частот (УЗ сверхвысокой частоты, СВЧ-УЗ) должен быть более эффективным при лечении боли. Следует отметить, что, как обсуждалось выше, ультразвуковые волны демонстрируют частотно-зависимую модуляцию генерации и распространения ПД в аксональной мембране. Кроме того, индуцированная УЗ экспрессия Hsp72, которая происходит почти параллельно экспрессии Cav-1²⁵, сильно зависит от частоты и возрастает с увеличением частоты УЗ.⁵⁰

Анализ профилей экспрессии генов, индуцированных УЗ, показал, что ген CAV1 действительно сильно активируется после применения УЗ низкой интенсивности.⁵¹ В то же время стрессорно-зависимая модуляция Cav-1 демонстрирует двухфазное поведение: низкоинтенсивная стимуляция обычно обеспечивает усиленную экспрессию Cav-1, в то время как приложение сильного механического стресса приводит к деградации Cav-1.⁵² Кроме того, ультразвуковые волны разной частоты могут вызывать очень разную величину механического стресса в клетках, что может либо должным образом модулировать, либо не модулировать вовсе, либо неправильно модулировать локальную экспрессию Cav-1. Недавние исследования также показали, что УЗ может стимулировать механочувствительные каналы, тем самым напрямую влияя на нейроны и другие возбудимые клетки, и что вероятность такого возбуждения сильно зависит от протокола применения УЗ.⁵³ Это может быть важной причиной наблюдаемых неоднозначных результатов после применения УЗ для лечения боли. Интенсивность и частота УЗ, а также первичный статус экспрессии Cav-1 должны быть основными параметрами, определяющими прямые и косвенные взаимодействия ультразвуковых волн с аксонами и, следовательно, наблюдаемое уменьшение боли.

Некоторые применения СВЧ-УЗ для лечения боли

С учетом вышесказанного, СВЧ-УЗ должен быть эффективен при лечении различных типов периферической боли. Применение СВЧ-УЗ с частотой 10 МГц и выше при различных воспалительных и гиперпролиферативных состояниях обсуждалось в наших недавних публикациях.^{46,47,54–57} Здесь мы вкратце рассмотрим некоторые специальные клинические применения СВЧ-УЗ для уменьшения боли. Все приложения были выполнены на приборе LDM^®-MED (Wellcomet GmbH, Карлсруэ, Германия).

Действие СВЧ-УЗ в виде дуальных ультразвуковых волн частотой 3 МГц и 10 МГц, смешанных в специальном режиме LDM^® (локальный динамический микромассаж), на заживление ран и уменьшение боли было изучено в одноцентровом проспективном пилотном исследовании на десяти пациентах с хроническими венозными язвами на ногах.⁵⁸ В этом режиме ультразвуковые волны подаются в виде коротких, быстро колеблющихся пачек импульсов (в данном исследовании 5 мс 3 МГц и 5 мс 10 МГц с пространственной усредненной и временной интенсивностью ультразвука (SATA) 0,5-1,0 Вт/см²). Все пациенты продемонстрировали полное закрытие ран и сообщили о значительном уменьшении боли, по крайней мере, на три балла по 5-балльной числовой рейтинговой шкале (NRS) уже после 3-4 процедур (p <0,01). Влияние технологии СВЧ-УЗ на боль у пациентов, получавших инъекционный липолиз (ИЛ), было исследовано в рандомизированном одноцентровом контрлатеральном контролируемом пилотном исследовании на семи здоровых женщинах.⁵⁹ Боль является хорошо известным побочным эффектом ИЛ, в основном связанным с сильной воспалительной реакцией в тканях. Пациенты лечились в режиме LDM^® (5 мс 3 МГц и 5 мс 10 МГц с SATA 1,0 Вт/см²) один раз до и 10 раз после инъекционного липолиза. Боль оценивалась пациентами по 5-балльной шкале NRS. Комбинация процедур ИЛ + LDM^® обеспечила не только значительно более выраженное уменьшение жировой ткани по сравнению с чистым ИЛ, но также и значительное уменьшение боли (p <0,01). Ahn et al⁶⁰ представили ретроспективное исследование 58 пациентов, перенесших реконструкцию груди после мастэктомии, которые жаловались на послеоперационную боль, не поддававшуюся контролю с помощью лекарств. Пациенты получали LDM^® (10 МГц, SATA 1,0 Вт/см² и 1,5 Вт/см² в течение 2 минут каждое, затем LDM^® 3/10 МГц с SATA 1,0 Вт/см² и 2,0 Вт/см² в течение 3 минут каждое) каждый день или через день. Степень боли и дискомфорта при контрактуре оценивалась пациентами по 10-балльной шкале NRS. Оценка боли по шкале NRS снизилась с примерно 6,1 (до процедур) до примерно 3,8 (после процедур) (p <0,001), соответствующие значения NRS для дискомфорта составили 6,50 и 4,29, соответственно (p <0,001). Кроме того, в очень интересном описании клиническом случае, пациент с лучевым фиброзом и хронической болью, вызванной лучевой терапией после мастэктомии, получал LDM^® (10 МГц, SATA 1,0 Вт/см² и 1,5 Вт/см² в течение 2 минут каждое, затем LDM^® 3/10 МГц с SATA 1,0 Вт/см² и 2,0 Вт/см² в течение 3 минут каждое).⁶¹ Лечение началось примерно через 3 года после окончания лучевой терапии. После второй процедуры LDM^® пациент сообщил о значительном уменьшении боли, которая уменьшилась с 6 до 2 баллов по 10-балльной шкале NRS. Эти примеры демонстрируют, что СВЧ-УЗ действительно может эффективно применяться для лечения разных типов боли.

Заключение

Недавние результаты, полученные в быстро развивающейся области ультразвуковой нейростимуляции, продемонстрировали важную роль механических поверхностных волн в генерации и распространении потенциалов действия. Реципрокное взаимодействие между электрическими и механическими волнами, наблюдаемое в аксональной мембране во время ее возбуждения, приводит к смещению парадигмы, делая «разъединение» электромеханических сигналов интересной мишенью при лечении боли. Это разъединение может быть реализовано либо путем прямого возмущения механических поверхностных волн в аксональной мембране, либо путем сильного смещения термодинамического состояния этой мембраны от точки ее фазового перехода. В то время как первый эффект может иметь чисто механическую природу, второй потребует приложения термомеханического стресса. Оба эффекта могут быть эффективно реализованы путем применения ультразвуковых волн сверхвысокой частоты. Дополнительной мишенью для применения ультразвука при лечении боли является кавеолин-1, который широко присутствует в шванновских клетках, а также в неаксональных тканях. Недавние исследования показали, что ультразвук может значительно модулировать экспрессию кавеолина-1 частотно-зависимым образом, регулируя процессы, участвующие в воспалении, формировании отека и восстановлении повреждений в пораженной области. Обе мишени демонстрируют частотно-зависимую реакцию, что делает ультразвук сверхвысокой частоты многообещающим методом лечения боли. Чтобы выяснить особенности взаимодействия ультразвука с этими новыми мишенями, потребуются дальнейшие исследования.

Сокращения

АП - потенциалы действия; Cav - кавеолин; ЦОГ - циклооксигеназа; Hsp - белок теплового шока; ИЛ - инъекционный липолиз; LDM - местный механический микромассаж; NRS - числовая рейтинговая шкала; PGE₂ - простагландин E2; PPARγ - гамма-рецептор, активируемый пероксисомным пролифератором; TRPA1 - ионный канал транзиторного рецепторного потенциала анкирина 1; СВЧ-УЗ - сверхвысокочастотный ультразвук; УЗ - ультразвук.

Раскрытие

ILK является управляющим партнером компании Wellcomet GmbH. Компания Wellcomet GmbH предоставила ILK поддержку в виде заработной платы, но не играла никакой дополнительной роли в принятии решения о публикации или подготовке рукописи. Коммерческая аффилированность ILK с компанией Wellcomet GmbH не влияет на соблюдение всех политик журналов по обмену данными и материалами. О других конфликтах интересов в отношении этой работы автор не сообщает.

Список использованной литературы

Journal of Pain Research - это международный рецензируемый онлайн-журнал с открытым доступом, который приветствует лабораторные и клинические результаты в области исследования боли, а также предотвращения и контроля боли. Для публикации рассматриваются оригинальные исследования, обзоры, отчеты симпозиумов, гипотезы и комментарии. Система управления рукописями полностью интерактивна и включает в себя очень быструю и справедливую систему рецензирования, которая проста в использовании. Посетите http://www.dovepress.com/testimonials.php, чтобы прочитать настоящие цитаты опубликованных авторов.